二氧化碳培养箱是在普通培养箱的基础上加以改进,能加人 (艾毛,以满足培养微生物所需的环境。主要用于组织培养和一些 特殊微生物的培养。
(1)恒温控制
为保持稳定的恒温效果.应具有不容易受周 围温度影响的保温及温度调节。一般的培养箱常用水套式借以阻 隔外界温度变化对箱内温度的影响,此型箱体较适于外部环境沮 度变化较大的实验室,另一种箱体是气套恒温,温度恢复速度 快。控温范围在室温40℃间,控温精度为0.1℃--0.5℃。为 防止万一温度调节器有故障时温度失控过热,培养箱有报警装 置。使用时间较长的培养箱,要进行温度校准。
(2) CO2浓度控制
为维持长时间细胞培养所需的pH值, 经一定方式控制间歇性地向箱内注人二氧化碳气体,以使pH精 确的控制在7.2---7.4,对应的C02浓度控制是5%,要 求CO2的浓度应长期处于稳定状态。Cq浓度控制是通过置于 箱内的传感器来进行的,传感器将感受信号反馈给控制器,控制 器控制着CO2气路阀门的开关。CO2传感器有热导、红外线及 超声三种形式,以热导式最为常见,但其灵敏度受湿度的影响较 大,故有时选用非分散红外线式。需要对CO2浓度控制进行校 准,校准常使用经典的Fyrite法,当然还可利用血气分析仪等气 体标测仪器。在实验中,开门取放样品时,会造成箱内CO2浓 度改变。故要求培养箱要有CO2快速恢复注人机制。
(3)湿度控制
为减少因培养液蒸发所引起的渗透压变化, 理论上培养箱内需要100%的饱和水蒸气;但为避免箱内结露, 以保持98%相对湿度为适。控制湿度的方法多数是在培养箱底 部放且盛满水的水盘,靠水的蒸发来维持湿度;有的培养箱带有 数字显示湿度监测,用以指示到一定时间要补充加水。现代较高 档的培养箱还设有自动湿度控制功能,这是通过控制一个雾化器 来实现的。
(4)无菌控制
二氧化碳培养箱的无菌控制主要体现在三个 方面:一是箱体的内部构造要适于清洗灭菌,避免死角。格盘、 沟楷等零件应能够简单拆卸便于灭菌处理,并严格进行通气管 理,进人箱内的CO2气路及空气气路要连接0.225m以下的空气 滤器;二是定期用消毒剂消毒,如用酒精擦拭盘架和箱体内侧, 放叠氮钠溶液等。三是通过培养箱自装的灭菌设施,如有的培养 箱装有紫外灯,近代生产的培养箱有的机型还可以进行24小时 或48小时电热高温消毒。 |